Plásmido Doble Nickase (h) FcRn: sc-400689-NIC

FCGRT codifica el receptor Fc neonatal (FcRn), un heterodímero relacionado con el MHC de clase I que se une a IgG y a la albúmina de manera dependiente del pH para mediar el rescate intracelular y la transcitosis bidireccional. FcRn funciona dentro de las vías de tráfico endosomal, clasificando el ligando a pH ácido y liberándolo en la superficie celular, moldeando así la homeostasis de los anticuerpos, el manejo de antígenos y la inmunidad mucosal. En los compartimentos endotelial y epitelial, FcRn influye en el transporte mediado por Fc y en el reciclaje de IgG, con impacto en contextos de señalización inflamatoria donde la disponibilidad de IgG y la dinámica de los complejos inmunes son críticas. La actividad alterada de FcRn/FCGRT se ha investigado en relación con la autoinmunidad y los mecanismos de enfermedades inflamatorias debido a sus efectos sobre la persistencia de IgG y las respuestas inmunes dependientes de Fc.

FcRn El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FCGRT en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FCGRT. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FCGRT. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FCGRT alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.