Plasmide Double Nickase (h) FBXO34: sc-412420-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FBXO34 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FBXO34 Double Nickase (h) et le plasmide FBXO34 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FBXO34. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FBXO34 | sc-412420-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FBXO34 | sc-412420-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FBXO34 code une protéine à domaine F-box, dont on prévoit qu’elle agisse comme composant de reconnaissance des substrats des complexes ligase E3 à ubiquitine de type SCF (SKP1–CUL1–F-box), en couplant des cibles spécifiques à l’ubiquitination et à leur dégradation par le protéasome. Par ce rôle, FBXO34 peut influencer la protéostasie, la progression du cycle cellulaire et la dynamique des voies de signalisation en régulant la stabilité des effecteurs de ces voies. Des altérations de l’activité du système ubiquitine–protéasome sont largement impliquées dans la stabilité génomique, les réponses au stress et des phénotypes pertinents pour le cancer, ce qui fait de FBXO34 un nœud utile pour des études mécanistiques de la dégradation régulée des protéines. L’étude de FBXO34 soutient la cartographie des voies d’ubiquitination dépendantes de SCF et l’identification de substrats en aval reliant le renouvellement des protéines à l’homéostasie cellulaire.
FBXO34 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FBXO34 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FBXO34. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FBXO34. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FBXO34.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.