FBL19 Lentiviral Activation Particles (h): sc-407318-LAC

FBXL19 (FBL19) kodiert ein F-Box- und leucinreiches Repeat-Protein, das als Substraterkennungskomponente von SCF-(SKP1–CUL1–F-Box)-E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexen fungiert und bestimmte Proteine zur Ubiquitinierung und zum proteasomalen Abbau lenkt. Durch die Kontrolle der Proteinstabilität trägt FBXL19 zur Regulation der Zellzyklusprogression, der Signaltransduktion und chromatinassoziierter Prozesse bei, die Transkriptionsprogramme prägen. FBXL19 wurde zudem mit der Regulation CpG-Insel-assoziierter Gene über Interaktionen mit Chromatin und der Transkriptionsmaschinerie in Verbindung gebracht und verknüpft damit Ubiquitin-Signalisierung mit epigenetischer Kontrolle. Eine fehlregulierte, ubiquitinvermittelte Proteostase und Transkriptionsregulation unter Beteiligung von FBXL19 ist relevant für Studien zu onkogener Signalgebung, Differenzierung und weiteren krankheitsassoziierten zellulären Zuständen.

FBL19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FBXL19-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FBL19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FBXL19-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FBL19-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FBXL19-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.