FAT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420291-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAT1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FAT1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase FAT1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Fat1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAT1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420291-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Fat1 de camundongo codifica a FAT1, uma caderina atípica que regula a adesão célula–célula, a polaridade e a migração direcional por meio da coordenação da dinâmica do citoesqueleto de actina e de componentes da sinalização Hippo. A FAT1 contribui para a polaridade celular planar e para a morfogênese tecidual ao influenciar a organização das junções e sinais associados à membrana que moldam a arquitetura epitelial. A disrupção de programas de adesão e polaridade dependentes de FAT1 tem sido associada a anomalias do desenvolvimento e a alterações no controle de crescimento em contextos relevantes para doenças, tornando-a um ponto útil para estudar como redes mecânicas e de sinalização se integram para governar a integridade tecidual. Em modelos e sistemas celulares de camundongo, a FAT1 oferece um ponto de entrada tratável para investigar vias que conectam caderinas juncionais, remodelamento do citoesqueleto e regulação da proliferação dependente de contato.
FAT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Fat1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Fat1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Fat1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Fat1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.