FAST-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406686

개요

FOXH1은 포크헤드 박스 전사인자 FAST-1을 암호화하며, TGF-β 슈퍼패밀리 신호전달의 핵 내 매개자로서 SMAD2/3–SMAD4 복합체와 협력해 NODAL/Activin 반응성 전사를 조절합니다. FAST-1은 표적 프로모터의 포크헤드 모티프에 결합하고, 상황 의존적 전사 프로그램을 통해 중배엽–내배엽(메센도덤) 분화 결정, 좌우 축 패터닝, 상피–간엽 전이(EMT)를 조절하는 발달 신호를 통합합니다. FOXH1 활성의 이상은 선천성 좌우 비대칭(측성) 결함 및 초기 배아 발달 장애와 연관되어 왔으며, TGF-β/SMAD 전사 출력의 변화는 침윤과 전이 같은 종양성 과정과도 흔히 관련됩니다. 세포 모델에서 FOXH1은 분화와 종양 세포 가소성에 영향을 미치는 SMAD 보조인자 사용, 크로마틴 모집, 그리고 경로 간 크로스토크를 분석하기 위한 다루기 쉬운 핵심 노드로 활용됩니다.

FAST-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FOXH1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FOXH1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FOXH1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FAST-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FAST-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FOXH1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FAST-1 기능에 중요한 FOXH1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FOXH1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FAST-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FAST-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FOXH1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FAST-1 HDR 플라스미드 (h) 및 FAST-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FOXH1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FOXH1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.