FAPα Lentiviral Activation Particles (h): sc-401511-LAC

Das Fibroblasten-Aktivierungsprotein alpha (FAPα, Gen FAP) ist eine Typ-II-Transmembran-Serinprotease aus der Familie der Dipeptidylpeptidasen mit sowohl Dipeptidylpeptidase- als auch Endopeptidase-Aktivität. Es ist typischerweise in aktivierten Fibroblasten und perivaskulären Stromazellen angereichert, wo es zum Umbau der extrazellulären Matrix, zum Kollagenumsatz und zur Regulation der Gewebearchitektur beiträgt. Durch die proteolytische Verarbeitung von Matrix- und signalassoziierten Substraten beeinflusst FAPα Stromata–Immun-Interaktionen, Programme der Wundheilung und fibrotische Remodelling‑Signalwege. Eine erhöhte FAP-Expression ist häufig mit desmoplastischem Tumorstroma, chronischer Entzündung und fibroseassoziierten Mikroumgebungen verknüpft und macht FAP zu einem relevanten Ziel für die Untersuchung der Stromabiologie und der Regulation der Mikroumgebung in Modellen menschlicher Erkrankungen.

FAPα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente FAP-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

FAPα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der FAP-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen FAPα-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen FAP-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.