FAM83B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-415158

Übersicht

FAM83B (Familie mit Sequenzähnlichkeit 83, Mitglied B) ist ein zytoplasmatischer Signaladapter, der an der Verstärkung von Rezeptor-Tyrosinkinase-Signalen und der nachgeschalteten Aktivität des MAPK/ERK-Signalwegs beteiligt ist und damit Proliferations- und Überlebensprogramme in Epithelzellen unterstützt. Es wurde mit der Modulation der Dynamik der EGFR/RAS-Signalübertragung und mit Wechselwirkungen mit PI3K-assoziierten Prozessen in Verbindung gebracht, was transkriptionelle Antworten und den Zellzyklusverlauf beeinflusst. Eine dysregulierte FAM83B-Expression wurde in mehreren Tumorkontexten beschrieben und wird als Beitrag zur Robustheit onkogener Signalwege, zu therapietoleranten Phänotypen und zu einer veränderten Abhängigkeit von Wachstumsfaktoren untersucht. Diese Eigenschaften machen FAM83B zu einem nützlichen Knotenpunkt, um die Verschaltung von Signalwegen, Feedback-Kontrolle und Genotyp-Phänotyp-Beziehungen in Modellen der Krebsbiologie zu analysieren.

Das FAM83B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FAM83B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FAM83B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FAM83B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FAM83B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FAM83B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FAM83B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FAM83B-Exone abzielen, die für die FAM83B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FAM83B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FAM83B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FAM83B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FAM83B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FAM83B HDR-Plasmid (h) und FAM83B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FAM83B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FAM83B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.