FAM127B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406247

Übersicht

FAM127B (family with sequence similarity 127 member B) kodiert ein bislang nur unzureichend charakterisiertes menschliches Protein mit begrenzter funktioneller Annotation und ist daher für eine systematische genetische Untersuchung von Interesse. Die vorliegenden Hinweise deuten auf Rollen in der zellulären Homöostase und in genregulatorischen Prozessen hin, mit möglichen Verbindungen zu Signalwegen und Transkriptionsprogrammen, die Proliferation und Stressantworten beeinflussen. Wie bei anderen wenig erforschten Mitgliedern der FAM-Familie wurden in Teilmengen humaner Krankheitsdatensätze veränderte Expression oder Kopienzahl berichtet, was Untersuchungen in Krebs und anderen komplexen Phänotypen unterstützt. Die Aufklärung der Funktion von FAM127B kann helfen, seinen Beitrag zur Verschaltung von Signalwegen, zur Aufrechterhaltung von Zellzuständen und zu kontextabhängigen Verwundbarkeiten zu verstehen.

Das FAM127B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FAM127B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FAM127B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FAM127B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FAM127B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FAM127B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FAM127B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FAM127B-Exone abzielen, die für die FAM127B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FAM127B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FAM127B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FAM127B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FAM127B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FAM127B HDR-Plasmid (h) und FAM127B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FAM127B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FAM127B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.