Factor XII Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409611
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Factor XII El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Factor XII, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Factor XII Anticuerpo (C-8): sc-376770
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Factor XII Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409611 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
F12 codifica el factor de coagulación XII, un zimógeno de serinproteasa que inicia la vía de activación por contacto al exponerse a superficies con carga negativa, lo que desencadena la activación del FXI y propaga la coagulación intrínseca. El factor XII activado (FXIIa) también conecta la coagulación con el sistema calicreína–cininas al promover la activación de la precalicreína y la generación de bradicinina, vinculando la hemostasia con la inflamación y la permeabilidad vascular. A través de estas cascadas, F12 contribuye a la señalización tromboinflamatoria e interactúa con vías del complemento y de la inmunidad innata. La actividad desregulada de FXII se estudia en contextos como la biología de la trombosis, los mecanismos del angioedema y los trastornos vasculares inflamatorios, lo que convierte a F12 en un nodo útil para el análisis de vías en modelos de sangre y endotelio.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Factor XII (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen F12 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del F12 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de F12 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Factor XII.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en F12 para la investigación de la señalización de Factor XII, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de F12 críticos para la función de Factor XII
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de F12 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Factor XII CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Factor XII CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus F12. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Factor XII (h) y el plásmido HDR Factor XII (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología F12 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana F12 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.