Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Factor IX (h): sc-402469
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Factor IX Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Factor IX, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Factor IX Antibody (B-3): sc-377187
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Factor IX (h) | sc-402469 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène humain **F9** code le facteur de coagulation IX, un zymogène de sérine protéase dépendant de la vitamine K, activé en facteur IXa et intervenant dans la voie intrinsèque de la coagulation sanguine. En complexe avec le facteur VIIIa à la surface des phospholipides, le facteur IXa catalyse l’activation du facteur X, favorisant la génération de thrombine et la formation d’un caillot de fibrine. L’activité de **F9** est modulée par la γ-carboxylation post-traductionnelle et la liaison à la membrane dépendante du calcium, ce qui le relie au traitement des protéines hépatiques et aux cascades protéolytiques extracellulaires. Une altération ou une déficience fonctionnelle de **F9** est associée à des phénotypes hémorragiques héréditaires et fait l’objet d’études de routine pour comprendre la régulation du réseau de coagulation et les interactions protéase–cofacteur.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Factor IX (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène F9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du F9, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert F9 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Factor IX.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en F9 pour l'étude de la signalisation de Factor IX, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de F9 essentiels à la fonction de Factor IX
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de F9 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Factor IX plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Factor IX plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus F9. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Factor IX plasmide HDR (h) et le Factor IX (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie F9 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles F9 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.