F4/80 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420168

Descripción general

Adgre1 codifica el antígeno murino F4/80 (EMR1), un receptor de adhesión acoplado a proteína G de la familia EGF‑TM7, expresado de forma destacada en macrófagos residentes en tejidos y poblaciones mieloides relacionadas. F4/80 se utiliza comúnmente para identificar subpoblaciones de macrófagos y se ha implicado en la regulación de la diferenciación de los macrófagos, su localización tisular y la homeostasis inmunitaria mediante interacciones célula–célula y la detección del entorno. Sus patrones de expresión se solapan con vías que controlan la activación de la inmunidad innata, la presentación de antígenos y las redes de citocinas inflamatorias dentro de los microambientes tisulares. Las alteraciones en la abundancia o la polarización de macrófagos asociadas a la expresión de Adgre1/F4/80 se estudian con frecuencia en trastornos inflamatorios, enfermedades metabólicas, biología de las infecciones, neuroinflamación y biología de los macrófagos asociados a tumores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO F4/80 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adgre1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adgre1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adgre1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína F4/80.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adgre1 para la investigación de la señalización de F4/80, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adgre1 críticos para la función de F4/80
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adgre1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido F4/80 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido F4/80 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adgre1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR F4/80 (m) y el plásmido HDR F4/80 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adgre1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adgre1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.