Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Evx-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420249
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Evx-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Evx-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Evx-1 Anticuerpo (397.3): sc-81962
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Evx-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420249 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Evx1 codifica el factor de transcripción con homeobox Evx-1, un regulador del desarrollo que establece patrones en el embrión y ayuda a especificar decisiones de destino celular a lo largo del eje anteroposterior. En el ratón, Evx-1 participa en redes transcripcionales que coordinan la morfogénesis, incluidos programas génicos vinculados al patrón del tubo neural, la regionalización del rombencéfalo y la médula espinal, y el desarrollo somítico. Como proteína de unión al ADN específica de secuencia, Evx-1 influye en vías de señalización y de diferenciación aguas abajo al controlar estados transcripcionales restringidos por linaje. La actividad desregulada de genes homeobox, incluidos programas EVX1 alterados, se estudia por su impacto en malformaciones congénitas y fenotipos de diferenciación aberrantes en modelos de desarrollo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Evx-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Evx1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Evx1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Evx1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Evx-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Evx1 para la investigación de la señalización de Evx-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Evx1 críticos para la función de Evx-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Evx1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Evx-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Evx-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Evx1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Evx-1 (m) y el plásmido HDR Evx-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Evx1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Evx1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.