ERRβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424021
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ERRβ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ERRβ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ERRβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424021 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El receptor beta relacionado con el estrógeno (ERRβ), codificado por el gen Esrrb en ratón, es un receptor nuclear huérfano que actúa como factor de transcripción coordinando programas génicos implicados en el metabolismo energético, la función mitocondrial y las decisiones de destino celular. En células pluripotentes, Esrrb contribuye al mantenimiento de la autorrenovación y se integra con redes transcripcionales centrales que regulan la diferenciación y el compromiso de linaje. La actividad de ERRβ está vinculada a la señalización de receptores de hormonas esteroideas y a un control transcripcional más amplio de vías oxidativas y del desarrollo. La desregulación de la transcripción dependiente de Esrrb se ha asociado con resultados del desarrollo alterados y con cambios dependientes del contexto en la proliferación celular y el estado metabólico, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en modelos relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ERRβ (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Esrrb en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Esrrb junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Esrrb tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ERRβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Esrrb para la investigación de la señalización de ERRβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Esrrb críticos para la función de ERRβ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Esrrb para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ERRβ CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ERRβ CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Esrrb. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ERRβ (m) y el plásmido HDR ERRβ (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Esrrb para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Esrrb definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.