ERK 1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400010-LAC

MAPK3 kodiert die extrazellulär signalregulierte Kinase 1 (ERK1), eine Serin/Threonin-Kinase, die vorgeschaltete Signale von Rezeptor-Tyrosinkinasen, der RAS–RAF-Signalgebung und MEK1/2 integriert, um phosphorylierungsabhängige Programme der Proliferation, Differenzierung, des Überlebens und der Stressantwort zu steuern. ERK1 wirkt innerhalb der kanonischen MAPK/ERK-Kaskade und moduliert nukleäre und zytoplasmatische Substrate, darunter Transkriptionsfaktoren und Zellzyklusregulatoren, um kontextspezifische Genexpression zu formen. Eine fehlregulierte Aktivität des ERK-Signalwegs ist in unterschiedlichen Krankheitskontexten häufig mit aberranter Wachstumssignalgebung und veränderten Zellschicksalsentscheidungen assoziiert, wodurch MAPK3 einen zentralen Knotenpunkt für mechanistische Untersuchungen von Signaldynamik und Pathway-Crosstalk darstellt.

ERK 1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MAPK3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ERK 1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MAPK3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ERK 1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MAPK3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.