Epiregulin Double Nickase Plasmid (h): sc-404273-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Epiregulin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Epiregulin Double-Nickase-Plasmid (h) und Epiregulin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf EREG abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Epiregulin Double Nickase Plasmid (h) | sc-404273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Epiregulin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EREG kodiert Epiregulin, einen sezernierten Liganden der EGF-Familie, der die EGFR/ERBB-Signalübertragung aktiviert und dadurch Proliferation, Migration und Differenzierung von Epithel- und Stromazellen reguliert. Die Bindung von Epiregulin an Rezeptor-Tyrosinkinasen fördert nachgeschaltete Aktivität der MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Signalwege und beeinflusst damit Zellzyklusprogression und Überlebensprogramme. Eine aberrante EREG-Expression wurde mit fehlregulierten Entzündungsreaktionen, Phänotypen der Wundheilung und onkogenen Signalkontexten in Verbindung gebracht, in denen ein Umbau der EGFR-Signalwege zu Tumorwachstum, Invasion und Crosstalk mit dem Mikroumfeld beiträgt. Als Modulator auf Ligandenebene der ERBB-Netzwerk-Output wird EREG häufig in Modellen der Epithelbiologie, zytokingetriebener Signalgebung und krebsassoziierter Signalwegabhängigkeiten untersucht.
Epiregulin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des EREG-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von EREG abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die EREG-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit EREG-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.