EphB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420199
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphB2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EphB2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphB2 Anticorpo (2D12C6): sc-130068
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420199 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ephb2 codifica o EphB2, uma tirosina-quinase receptora do sistema de sinalização ephrin–Eph que medeia comunicação dependente de contato entre células vizinhas. Ao ligar-se a ligantes ephrin-B ancorados à membrana, o EphB2 desencadeia sinalização bidirecional que regula a remodelação do citoesqueleto, a adesão celular e a migração direcional, com papéis de destaque na orientação axonal, na organização de sinapses e na formação de fronteiras teciduais. Em modelos murinos, a sinalização dependente de EphB2 influencia a montagem de circuitos neuronais e o padrão de vascularização, e tem sido associada a fenótipos que envolvem posicionamento celular alterado e comportamento invasivo. A atividade desregulada de EphB2 é frequentemente estudada no contexto de defeitos do desenvolvimento e de vias relacionadas ao câncer que controlam motilidade e compartimentalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EphB2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ephb2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ephb2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ephb2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EphB2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ephb2 para a investigação da sinalização de EphB2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ephb2 críticos para a função EphB2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ephb2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EphB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo EphB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ephb2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EphB2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR EphB2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ephb2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ephb2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.