ENC1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420175

개요

ENC1(ectodermal-neural cortex 1)은 세포골격 조직화와 세포 분화 프로그램에 관여하는, 액틴과 연관된 어댑터로 기능하는 kelch 반복(kelch repeat) 포함 단백질을 암호화합니다. 생쥐 조직에서 ENC1 발현은 신경계 및 기타 분화 중인 계통에서 풍부하게 나타나며, 산화 스트레스 반응 조절과 단백질 항상성 유지와의 연관성이 보고되어 왔습니다. 보고된 상호작용 및 경로 연관성에 따르면 ENC1은 세포 형태 변화, 신경돌기(neurite) 성장, 그리고 세포골격 연관 단백질의 조절된 분해/턴오버를 관장하는 과정에 관여하며, 유비퀴틴 의존적 기전과의 크로스토크도 포함됩니다. ENC1 발현의 이상 조절은 신경발달 변화 및 종양 생물학과 관련된 맥락에서 관찰되어 왔으며, 분화 상태와 스트레스 적응 신호를 연구하기 위한 분자적 핸들로서의 활용을 뒷받침합니다.

ENC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Enc1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Enc1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Enc1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ENC1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ENC1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Enc1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ENC1 기능에 중요한 Enc1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Enc1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ENC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ENC1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Enc1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ENC1 HDR 플라스미드 (m) 및 ENC1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Enc1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Enc1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.