EMILIN-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406521
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EMILIN-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EMILIN-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EMILIN-2 Anticorpo (3D9): sc-517180
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EMILIN-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406521 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EMILIN2 codifica a EMILIN-2, uma glicoproteína da matriz extracelular enriquecida em microfibrilas associadas a fibras elásticas, que contribui para a organização da matriz e para a sinalização célula–matriz. A EMILIN-2 interage com a adesão mediada por integrinas e com a mecanotransdução, influenciando a dinâmica do citoesqueleto, a migração e a remodelação tecidual. Por meio desses sinais extracelulares, EMILIN2 pode modular vias relacionadas à inflamação e à homeostase vascular e estromal, incluindo processos que moldam respostas angiogênicas e fibróticas. A desregulação da expressão de EMILIN2 e alterações na arquitetura da matriz têm sido associadas à remodelação do microambiente tumoral e a defeitos da matriz extracelular relacionados ao sistema cardiovascular, reforçando sua relevância em pesquisas sobre mecanismos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EMILIN-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EMILIN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EMILIN2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EMILIN2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EMILIN-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EMILIN2 para a investigação da sinalização de EMILIN-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EMILIN2 críticos para a função EMILIN-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EMILIN2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EMILIN-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EMILIN-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EMILIN2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EMILIN-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EMILIN-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EMILIN2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EMILIN2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.