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EGR1慢病毒激活颗粒(r) | sc-437290-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
EGR1慢病毒激活颗粒(r2) | sc-437290-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
EGR1(early growth response 1)是一种即刻早期转录因子,可被促有丝分裂信号和应激信号迅速诱导,在大鼠细胞中作为刺激依赖性基因表达程序的核心调控因子发挥作用。它整合来自 MAPK/ERK、PKC、钙信号以及生长因子通路的上游输入,调控与细胞周期进程、分化、凋亡和突触可塑性相关的转录。EGR1 还调节参与细胞外基质重塑、细胞因子与趋化因子信号传导以及血管和神经元活动的下游网络,因此在炎症、纤维化和神经适应等模型中具有广泛相关性。在多种与疾病相关的情境中,EGR1 活性失调与增殖和应激反应表型的改变有关,支持其作为用于通路解析的机制性关键节点。
EGR1 慢病毒激活颗粒(r)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 表达。
EGR1 慢病毒激活颗粒(r)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性EGR1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。