EGFL6 Double Nickase Plasmid (h): sc-411850-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das EGFL6 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- EGFL6 Double-Nickase-Plasmid (h) und EGFL6 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf EGFL6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
EGFL6 Double Nickase Plasmid (h) | sc-411850-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EGFL6 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-411850-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EGFL6 kodiert das epidermale Wachstumsfaktor‑ähnliche Protein 6, einen sezernierten, mit der extrazellulären Matrix assoziierten Faktor, der insbesondere in vaskulären und entwicklungsbiologischen Kontexten angereichert ist. Es trägt zu Zell‑Matrix‑Interaktionen, zum Verhalten von Endothel‑ und Stromazellen sowie zur Regulation von Migration und Adhäsion bei – über Signalnetzwerke, die sich mit integrinvermittelten Signalwegen und wachstumsfaktorresponsiven Programmen überschneiden. Die EGFL6‑Expression wurde mit Gewebeumbau und angiogenen Prozessen in Verbindung gebracht, die in Tumormikroumgebungen und anderen Pathologien mit aberranter Gefäßneubildung häufig verändert sind. Daher wird EGFL6 häufig hinsichtlich seiner Rolle in der extrazellulären Signalübertragung, der Organisation der Matrix und der Modulation proliferativer und motilitätsbezogener Phänotypen in humanen Zellmodellen untersucht.
EGFL6 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des EGFL6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von EGFL6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die EGFL6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit EGFL6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.