Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408947
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- EAP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico EAP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: EAP1 Anticuerpo (C-9): sc-514772
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
EAP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408947 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IRF2BPL codifica EAP1, una proteína nuclear con dominio RING finger implicada en el control transcripcional y en la regulación dependiente de ubiquitina de la estabilidad proteica. EAP1 se ha vinculado a la modulación de programas de expresión génica que influyen en la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la homeostasis neuronal, en consonancia con funciones en la proteostasis y la señalización sensible al estrés. La alteración genética de IRF2BPL se asocia con fenotipos de neurodesarrollo y neurodegeneración, lo que respalda su relevancia en vías que gobiernan el mantenimiento neuronal y la función sináptica. En consecuencia, IRF2BPL/EAP1 se estudia en mecanismos de regulación transcripcional, recambio ligado a la ubiquitinación y resiliencia celular en sistemas modelo humanos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO EAP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IRF2BPL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IRF2BPL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IRF2BPL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína EAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IRF2BPL para la investigación de la señalización de EAP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IRF2BPL críticos para la función de EAP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IRF2BPL para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido EAP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido EAP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IRF2BPL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR EAP1 (h) y el plásmido HDR EAP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IRF2BPL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IRF2BPL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.