Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DUSP5 Double Nickase Plasmid (h): sc-401837-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DUSP5 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DUSP5 Double-Nickase-Plasmid (h) und DUSP5 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DUSP5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: DUSP5: sc-393801
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DUSP5 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DUSP5 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Die Dual-Spezifitäts-Proteinphosphatase 5 (DUSP5) ist eine nukleäre MAPK-Phosphatase, die bevorzugt aktiviertes ERK1/2 dephosphoryliert und als Feedback-Regulator der RAF–MEK–ERK-Signalkaskade wirkt. Durch die Modulation ERK-abhängiger Transkriptionsprogramme beeinflusst DUSP5 die Zellzyklusprogression, Differenzierung und die stressresponsive Genexpression. Eine veränderte DUSP5-Expression oder -Aktivität wurde mit einer dysregulierten mitogenen Signalübertragung und einer in mehreren Krebszusammenhängen beobachteten Umverdrahtung von Signalwegen in Verbindung gebracht; zudem wird DUSP5 in Modellen des kardiovaskulären Remodelings und der inflammatorischen Signalgebung untersucht. Als wegspezifischer negativer Regulator wird DUSP5 häufig eingesetzt, um Mechanismen zu untersuchen, die die Amplitude, Dauer und nukleäre Retention von ERK-Signalen kontrollieren.
DUSP5 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DUSP5-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DUSP5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DUSP5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DUSP5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.