DTX3L Double Nickase Plasmid (m): sc-431621-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DTX3L Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DTX3L Double-Nickase-Plasmid (m) und DTX3L Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Dtx3l abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DTX3L Double Nickase Plasmid (m) | sc-431621-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DTX3L Double Nickase Plasmid (m2) | sc-431621-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTX3L (Deltex E3-Ubiquitin-Ligase 3L) ist eine RING-Typ-E3-Ubiquitin-Ligase, die mit PARP9 zusammenwirkt, um Ubiquitin-Signalwege zu regulieren, die mit DNA-Schadensantworten und interferon-stimulierten Signalwegen verknüpft sind. Durch die Modulation der Protein-Ubiquitinierung beeinflusst DTX3L chromatinassoziierte Prozesse, Transkriptionsprogramme und zelluläre Stress-Signalgebung, die die Ausprägung angeborener Immunantworten mitbestimmen. Maus-Dtx3l wurde im Kontext inflammatorischer Signalgebung sowie von Wirt–Pathogen-Interaktionen untersucht, bei denen eine ubiquitinvermittelte Regulation die Funktion von Immunzellen und zytokingetriebene Netzwerke beeinflussen kann. Fehlregulierte Ubiquitinierung und PARP-abhängige, mit DTX3L verbundene Signalwege sind außerdem relevant für Mechanismen der Genomstabilität und der Biologie onkogenen Stresses.
DTX3L Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Dtx3l-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Dtx3l abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Dtx3l-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Dtx3l-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.