Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DSC2 Double Nickase Plasmid (m): sc-420063-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DSC2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DSC2 Double-Nickase-Plasmid (m) und DSC2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Dsc2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DSC2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-420063-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DSC2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-420063-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Dsc2 kodiert Desmocollin‑2 (DSC2), ein calciumabhängiges Cadherin der Desmosomen, das eine starke Zell‑Zell‑Adhäsion in epithelialen und kardialen Geweben vermittelt. DSC2 koordiniert mit Desmogleinen, Plakoglobin, Plakophilinen und Desmoplakin, um Zellkontaktkomplexe an Intermediärfilamente zu koppeln und so Gewebeintegrität und Mechanotransduktion zu unterstützen. Über seine Rolle beim Aufbau von Desmosomen und beim Umbau von Zellkontakten beeinflusst DSC2 die epitheliale Differenzierung, die Barrierefunktion und Stressantworten, die mit Zytoskelett‑ und Signalwegen wie der durch PKC und Rho‑Familien‑GTPasen regulierten Dynamik von Zellkontakten verknüpft sind. Eine fehlregulierte DSC2‑Expression oder ‑Funktion wird mit beeinträchtigter Adhäsion und Phänotypen erhöhter Gewebebrüchigkeit in Verbindung gebracht; Störungen des Desmosoms sind in experimentellen Modellen zudem relevant für Veränderungen des Zellzusammenhalts im Kontext von Kardiomyopathien und Krebs.
DSC2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Dsc2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Dsc2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Dsc2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Dsc2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.