Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) DRAK2: sc-430202-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)DRAK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DRAK2 (m) y el plásmido de doble nickasa DRAK2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Stk17b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DRAK2 Anticuerpo (C-2): sc-398324
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) DRAK2 | sc-430202-NIC | 20 µg | $410.00 |
Stk17b codifica DRAK2 (quinasa 2 inductora de apoptosis relacionada con DAPK), una quinasa de serina/treonina que modula los umbrales de señalización de los linfocitos y las decisiones de destino celular sensibles al estrés. En células inmunitarias de ratón, DRAK2 se ha vinculado a la regulación de la señalización de calcio impulsada por el receptor de células T y de los programas transcripcionales posteriores que influyen en la activación, la anergia y la apoptosis. Al integrar la señalización por quinasas con procesos mitocondriales y del citoesqueleto, DRAK2 puede afectar la proliferación y la supervivencia en contextos hematopoyéticos. La actividad desregulada de STK17B/DRAK2 se ha asociado con disfunción inmunitaria y mecanismos de enfermedad inflamatoria, lo que respalda su uso como un nodo para estudiar el control de la señalización en inmunología y en investigación sobre muerte celular.
DRAK2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Stk17b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Stk17b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Stk17b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Stk17b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.