Plasmide Double Nickase (h) DOM3Z: sc-409469-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DOM3Z correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DOM3Z Double Nickase (h) et le plasmide DOM3Z Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DXO. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DOM3Z Antibody (D-9): sc-393167
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DOM3Z | sc-409469-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DOM3Z | sc-409469-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DXO (également connu sous le nom de DOM3Z) code une enzyme de décapsidation de l’ARN et une exonucléase de type métallo‑β‑lactamase, qui contribue au contrôle qualité des ARN dans le cytoplasme. DOM3Z participe à des voies de surveillance qui éliminent les ARN coiffés de manière aberrante ou traités de façon incomplète, modulant ainsi la stabilité des ARNm et couplant la décapsidation à la dégradation des ARN de 5′ vers 3′. En influençant le renouvellement des transcrits défectueux et des intermédiaires de dégradation, DXO aide à maintenir l’intégrité du transcriptome lors des réponses au stress cellulaire et au cours du traitement des ARN. La dérégulation des réseaux de dégradation et de surveillance des ARN est fréquemment associée à des programmes d’expression génique altérés observés dans les cancers ainsi que dans des contextes neurodégénératifs et inflammatoires, faisant de DXO une cible pertinente pour des études mécanistiques.
DOM3Z Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DXO dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DXO. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DXO. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DXO.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.