Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h): sc-407916
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- DGUOK Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique DGUOK, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DGUOK Antibody (H-3): sc-376267
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h) | sc-407916 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La désoxyguanosine kinase (DGUOK) est une désoxyribonucléoside kinase mitochondriale qui catalyse la phosphorylation des désoxyribonucléosides puriques, contribuant ainsi au pool mitochondrial de désoxynucléotides nécessaire à la réplication et à la réparation de l’ADN mitochondrial (ADNmt). Elle intervient dans les voies de sauvetage des nucléotides au sein de la mitochondrie et participe au maintien du génome, à la capacité de phosphorylation oxydative et à l’homéostasie bioénergétique cellulaire. Une activité altérée de DGUOK est associée à des phénotypes de déplétion de l’ADN mitochondrial et à des perturbations de la fonction mitochondriale, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des maladies mitochondriales, des syndromes hépatocérébraux et des anomalies du métabolisme énergétique dans les cellules humaines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène DGUOK dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du DGUOK, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert DGUOK à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine DGUOK.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en DGUOK pour l'étude de la signalisation de DGUOK, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de DGUOK essentiels à la fonction de DGUOK
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de DGUOK pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le DGUOK plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le DGUOK plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus DGUOK. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le DGUOK plasmide HDR (h) et le DGUOK (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie DGUOK pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles DGUOK définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.