Dexras2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r): sc-437366

Übersicht

Dexras2 (RASD2) ist ein kleines, Ras-verwandtes GTP-bindendes Protein, das in neuronalen Geweben angereichert ist und als Signalschalter nachgeschaltet von G‑Protein‑gekoppelten Rezeptoren sowie Signalwegen der neuronalen Stickstoffmonoxid-Synthase fungiert. Es trägt dazu bei, Rezeptorstimulation mit Veränderungen der zyklischen Nukleotid-Signalgebung, calciumabhängigen Antworten und synaptischer Plastizität zu koppeln, indem es die Adenylylcyclase und nachgeschaltete Kinasekaskaden moduliert. In Rattenmodellen wurde Dexras2 eingesetzt, um Mechanismen zu untersuchen, die zirkadiane und dopaminverknüpfte neuronale Signalübertragung steuern, mit Relevanz für neurobehaviorale Phänotypen und stressresponsive Schaltkreise. Eine Dysregulation von Signalknoten der RAS-Familie wie Dexras2 ist allgemein aufschlussreich für die Untersuchung fehlerhafter Signaltransduktion, neuronaler Erregbarkeit und des „Cross-talks“ zwischen Signalwegen, die an ZNS‑Dysfunktionen beteiligt sind.

Das Dexras2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in rat-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Dexras2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Dexras2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die Dexras2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Dexras2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r) und vom Dexras2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (r2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Dexras2 HDR-Plasmid (r) und Dexras2 HDR-Plasmid (r2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.