DDX60L Lentiviral Activation Particles (h): sc-413888-LAC

DDX60L (DExD/H-Box-Helikase 60-like) kodiert eine durch Interferon stimulierte RNA-Helikase, die an der angeborenen antiviralen Abwehr beteiligt ist, indem sie virale RNA-Spezies erkennt und verarbeitet. Das Gen ist mit der zytosolischen RNA-Sensorik und den mit Typ‑I‑Interferon verbundenen Transkriptionsprogrammen verknüpft und wirkt zusammen mit RNA-Helikase- und Mustererkennungsrezeptor-Signalwegen, die die antivirale Restriktion prägen. Die Aktivität von DDX60L wurde im Kontext der Dynamik der Interferon-Signalgebung, von Wirt–Virus-Interaktionen sowie der Regulation des RNA-Stoffwechsels unter inflammatorischem Stress untersucht. Eine veränderte Expression interferon-stimulierter Gene einschließlich DDX60L wird häufig bei immunvermittelten Erkrankungen und in virusassoziierten Tumormikroumgebungen beobachtet, was seine Relevanz als Forschungsziel für Immunologie und Infektionsbiologie unterstreicht.

DDX60L Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente DDX60L-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

DDX60L Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der DDX60L-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen DDX60L-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen DDX60L-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.