DDX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418103

概要

DDX11（DEAD/H-boxヘリカーゼ11。ChlR1としても知られる）はDNAヘリカーゼであり、姉妹染色分体のコヒージョン形成と効率的なDNA複製を促進することでゲノム安定性を支えます。複製に連動したDNA修復や複製フォークの進行に関与し、コヒージョンの確立ならびにより広範なDNA損傷応答経路と交差します。DDX11の活性は、複製ストレスに伴う染色体切断や異数性の発生を防ぐのに寄与し、その機能が染色体分配を保護する仕組みと結び付いています。DDX11の遺伝学的破綻や機能不全は、ワルシャワ断裂症候群を含むコヒーシン関連のゲノム不安定性表現型と関連しており、コヒージョン欠陥や複製関連DNA損傷の研究において重要です。

DDX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDDX11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DDX11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DDX11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DDX11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DDX11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DDX11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DDX11の機能に不可欠なDDX11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DDX11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DDX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDDX11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DDX11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DDX11 HDRプラスミド（h）および DDX11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDDX11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDDX11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。