DD4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403692-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DD4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DD4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DD4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AKR1C4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DD4 Anticorpo (WW3): sc-100526
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DD4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403692-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DD4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403692-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AKR1C4 codifica uma aldo-ceto redutase (AKR1C4; DD4) que catalisa a redução dependente de NADPH de aldeídos e cetoesteroides, contribuindo para o metabolismo hepático de hormônios esteroides e de ácidos biliares. A DD4 participa da desintoxicação de fase I ao modular a interconversão entre metabólitos esteroides ativos e inativos e ao processar compostos carbonílicos reativos gerados durante o estresse oxidativo. Por meio de seus papéis na redução de carbonilas e na homeostase de esteroides, a AKR1C4 influencia redes de sinalização metabólica ligadas ao manejo de lipídios e à depuração hepática de xenobióticos. Alterações na expressão ou na atividade de AKR1C4 têm sido associadas a perfis desregulados de metabólitos esteroides e a fenótipos metabólicos relacionados ao fígado, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da interação entre os sistemas endócrino e metabólico.
DD4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AKR1C4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AKR1C4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AKR1C4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AKR1C4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.