DCAF16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412364

Übersicht

DCAF16 kodiert einen mit DDB1 und CUL4 assoziierten Faktor, der an der Substraterkennung für die CRL4‑E3‑Ubiquitinligase-Maschinerie beteiligt ist und damit mit ubiquitinabhängiger Proteostase sowie der Regulation des nukleären Proteinumsatzes verknüpft ist. Als Bestandteil der Cullin‑RING‑Ubiquitinierungswege wurde DCAF16 mit Qualitätskontrollprozessen in Verbindung gebracht, die Transkriptionsprogramme und stressresponsive Signalwege im Zellkern beeinflussen. Eine veränderte Adapterfunktion von Ubiquitinligasen kann die Zellzykluskontrolle, DNA‑Schadensantworten und den RNA‑Stoffwechsel stören, wodurch DCAF16 einen relevanten Ansatzpunkt für mechanistische Studien in der Krebsbiologie und anderen Erkrankungen mit gestörter Protein-Homöostase darstellt.

Das DCAF16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des DCAF16-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des DCAF16-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von DCAF16 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die DCAF16-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von DCAF16-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der DCAF16-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf DCAF16-Exone abzielen, die für die DCAF16-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere DCAF16-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom DCAF16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom DCAF16 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des DCAF16-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das DCAF16 HDR-Plasmid (h) und DCAF16 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von DCAF16-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten DCAF16-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.