Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dab2 Double Nickase Plasmid (m): sc-419936-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Dab2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Dab2 Double-Nickase-Plasmid (m) und Dab2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Dab2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Dab2: sc-136964
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Dab2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-419936-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dab2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-419936-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Disabled homolog 2 (Dab2) kodiert ein endozytotisches Adapterprotein, das Cargo-Rezeptoren über Interaktionen mit Clathrin, AP-2 und Phospholipiden an die clathrinvermittelte Internalisierungsmaschinerie koppelt. In Mauszellen ist DAB2 an Rezeptor-Trafficking und Signalabschwächung beteiligt und beeinflusst Signalwege wie TGF-β und Wnt/β-Catenin, indem es die Rezeptorverfügbarkeit und die Intensität der nachgeschalteten Signalübertragung moduliert. Zudem trägt es zu epithelialer Polarität, Zelladhäsion und der Organisation des Zytoskeletts bei – Prozesse, die für Entwicklungspatterning und Gewebehomöostase zentral sind. Eine dysregulierte DAB2-Expression oder -Funktion wurde in experimentellen Modellen mit veränderter Differenzierung und migatorischen Phänotypen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie sowie für fibrotisches oder entzündliches Remodeling relevant sind.
Dab2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Dab2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Dab2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Dab2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Dab2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.