Plásmido Doble Nickase (m) D2DR/Dopamine D2 Receptor: sc-420053-NIC

Drd2 codifica el receptor dopaminérgico D2 (D2DR), un GPCR acoplado a Gi/o que inhibe la adenilil ciclasa, reduce la señalización de cAMP/PKA y modula la actividad de canales iónicos para moldear la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica. El D2DR se expresa en altos niveles en las neuronas espinosas medianas del estriado, donde integra el tono dopaminérgico con las entradas glutamatérgicas, influyendo en los circuitos de los ganglios basales, el control motor, la motivación y el aprendizaje por recompensa. La señalización del receptor activa vías que incluyen MAPK/ERK y cascadas dependientes de β-arrestina, vinculando la dinámica de neurotransmisores con programas de expresión génica y plasticidad. La función o expresión alterada de DRD2 se asocia con contextos de investigación neuropsiquiátrica y neurodegenerativa, incluidos estudios sobre desregulación dopaminérgica, farmacología de antipsicóticos y mecanismos conductuales a nivel de circuito.

D2DR/Dopamine D2 Receptor El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Drd2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Drd2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Drd2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Drd2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.