Plasmide Double Nickase (h) D1DR/Dopamine Receptor D1: sc-400532-NIC

DRD1 code pour le récepteur dopaminergique D1 (D1DR), un récepteur couplé aux protéines G qui se couple principalement à Gαs/olf pour stimuler l’adénylate cyclase, augmenter l’AMPc et activer une signalisation dépendante de la PKA. La signalisation de D1DR module l’excitabilité neuronale et la plasticité synaptique via la régulation des canaux ioniques, la transcription médiée par CREB et des interactions avec les voies MAPK/ERK. Dans le système nerveux central, DRD1 est un élément clé de la neurotransmission dopaminergique au sein des circuits striataux et corticaux, influençant le contrôle moteur, l’apprentissage lié à la récompense et la cognition. Une dérégulation de la signalisation et de l’expression du récepteur DRD1 est fréquemment étudiée dans le cadre des mécanismes de maladies neuropsychiatriques et neurodégénératives, notamment la maladie de Parkinson et la schizophrénie, ainsi que des adaptations liées à la consommation de substances.

D1DR/Dopamine Receptor D1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DRD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DRD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DRD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DRD1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.