CYYR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432449

概要

Cyyr1 は、システインおよびチロシンに富む保存性タンパク質である cysteine and tyrosine rich 1（CYYR1）をコードしており、細胞ストレス応答や、細胞骨格の構築と転写制御の接点における制御性シグナル伝達への関与が示唆されています。マウスモデルおよび細胞系では、CYYR1 の発現は炎症性刺激に応答し、接着や遊走に影響するリモデリング過程を含む上皮細胞および免疫細胞の挙動を制御する経路と関連づけられています。分子レベルでの相互作用パートナーはなお十分に解明されていないものの、CYYR1 は状況依存的に増殖および分化プログラムの調節に関与すると報告されています。Cyyr1 の発現異常は、炎症関連の組織リモデリングや腫瘍性形質に関係する状況で報告されており、機序解明を目的とした研究対象としての有用性を支持しています。

CYYR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCyyr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cyyr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cyyr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYYR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYYR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cyyr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYYR1の機能に不可欠なCyyr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cyyr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYYR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCYYR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cyyr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYYR1 HDRプラスミド（m）および CYYR1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCyyr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCyyr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。