非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
cytochrome c CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-417607
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cytochrome c CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在cytochrome c基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cytochrome c: sc-13156，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cytochrome c CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-417607 | 20 µg | $397.00 |
概述
CYCS 编码人类细胞色素 c（cytochrome c），这是一种位于线粒体膜间隙、含血红素的电子载体，在复合体 III（细胞色素 bc1 复合体）与复合体 IV（细胞色素 c 氧化酶）之间传递电子，以支持氧化磷酸化与细胞 ATP 生成。除生物能量学作用外，细胞色素 c 还是内源性（线粒体途径）凋亡的关键介质：当线粒体外膜通透化发生后，细胞色素 c 释放到细胞质中，并与 APAF1 和 caspase-9 共同组装形成凋亡小体（apoptosome）。CYCS 的功能还与氧化还原稳态、线粒体动态变化以及应激反应信号通路相互交织，因此在研究线粒体功能障碍时具有广泛意义。在神经退行性疾病、心脏代谢性损伤以及肿瘤细胞生存表型等背景中，研究者常常评估依赖细胞色素 c 的呼吸功能变化与凋亡能力改变。
cytochrome c CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CYCS基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CYCS基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CYCS开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使cytochrome c蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CYCS缺失的细胞模型，用于cytochrome c信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 cytochrome c 功能至关重要的 CYCS 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CYCS 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 cytochrome c CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 cytochrome c CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CYCS 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 cytochrome c HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 cytochrome c HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CYCS同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CYCS靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。