CYP2S1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405785

Übersicht

CYP2S1 kodiert das Cytochrom P450 2S1, eine extrahepatische Monooxygenase, die den oxidativen Metabolismus endogener Lipide und xenobiotischer Substrate katalysiert. Das Enzym wurde mit der Arachidonsäure- und Eicosanoid-Signalgebung in Verbindung gebracht, einschließlich der Oxygenierung von aus Fettsäuren abgeleiteten Mediatoren, die Entzündungs- und Stressantwortprogramme beeinflussen können. Die Expression von CYP2S1 ist in Epithelgeweben angereichert und wird durch Umwelt- und oxidative Signale reguliert, was seine Rolle in der Barrierebiologie und chemischen Abwehr unterstützt. Eine dysregulierte CYP2S1-Aktivität oder -Expression wurde in Kontexten wie Entzündung und Krebsbiologie mit verändertem Xenobiotika-Handling und gestörter Redoxhomöostase assoziiert und ist damit relevant für mechanistische Studien zu stoffwechselgetriebenen Phänotypen.

Das CYP2S1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CYP2S1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CYP2S1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CYP2S1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CYP2S1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CYP2S1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CYP2S1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CYP2S1-Exone abzielen, die für die CYP2S1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CYP2S1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CYP2S1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CYP2S1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CYP2S1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CYP2S1 HDR-Plasmid (h) und CYP2S1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CYP2S1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CYP2S1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.