Plásmido Doble Nickase (h) cyclin G2: sc-403620-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cyclin G2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin G2 (h) y el plásmido de doble nickasa cyclin G2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCNG2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: cyclin G2 Anticuerpo (1F9-C11): sc-293302
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin G2 | sc-403620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cyclin G2 | sc-403620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG2 codifica la ciclina G2, una ciclina atípica que con frecuencia se induce por señales que inhiben el crecimiento y contribuye a la regulación negativa de la progresión del ciclo celular, en particular alrededor de la transición G1/S. La ciclina G2 se integra con vías de señalización sensibles al estrés y puede modular el control de los puntos de control (checkpoints) y la proliferación celular mediante interacciones que influyen en la actividad de fosfatasas y en rutas dependientes de la fosforilación. La expresión alterada de CCNG2 se ha asociado con programas desregulados de proliferación y diferenciación, lo que la hace relevante para estudios de biología tumoral, homeostasis tisular y supresión del crecimiento dependiente del contexto. Su función reguladora también la vincula a respuestas celulares como la senescencia y la adaptación al estrés genotóxico o metabólico.
cyclin G2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCNG2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCNG2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCNG2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCNG2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.