CXCL16 Double Nickase Plasmid (h): sc-405248-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CXCL16 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CXCL16 Double-Nickase-Plasmid (h) und CXCL16 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CXCL16 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CXCL16: sc-514363
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CXCL16 Double Nickase Plasmid (h) | sc-405248-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CXCL16 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405248-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCL16 kodiert ein transmembranständiges Chemokin, das proteolytisch abgespalten werden kann und dadurch einen löslichen Liganden für CXCR6 erzeugt, der die Chemotaxis und die Retention aktivierter T‑Zellen, NK‑Zellen und weiterer Leukozytensubpopulationen koordiniert. Über CXCR6‑abhängige Signalwege trägt CXCL16 zur Leukozytenmigration, Adhäsion und zum entzündlichen Crosstalk in Geweben bei und verknüpft so Chemokingradienten mit Immunüberwachung und Gewebeumbau. Die membrangebundene Form fungiert zudem als Scavenger‑Rezeptor für oxidierte Lipide und apoptotische Zelltrümmer und verbindet damit die angeborene Immunerkennung mit entzündlichen Signalwegen. Eine dysregulierte Aktivität der CXCL16/CXCR6‑Achse wurde mit chronischen Entzündungserkrankungen, atherosklerosebezogenen Prozessen und der Dynamik des tumoralen Immunmikromilieus in Verbindung gebracht, wodurch sie ein relevantes Ziel für mechanistische Studien zur Immunpathologie darstellt.
CXCL16 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CXCL16-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CXCL16 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CXCL16-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CXCL16-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.