Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CUG-BP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403267
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CUG-BP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CUG-BP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CUG-BP2 Anticuerpo (1H2): sc-47731
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CUG-BP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403267 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CELF2 (CUG-BP2) es una proteína de unión a ARN de la familia CELF que coordina la regulación génica postranscripcional al controlar el empalme (splicing) alternativo, la estabilidad del ARNm y la traducción en diversos transcritos. Participa en el acoplamiento del procesamiento de ARN a señales durante la diferenciación celular y las respuestas al estrés, influyendo en redes implicadas en la organización del citoesqueleto, el control del ciclo celular y la apoptosis. Los programas de ARN dependientes de CELF2 contribuyen a la selección de isoformas de transcritos específica de tejido y se estudian con frecuencia en el contexto de la activación de células inmunitarias y la regulación génica del desarrollo. La actividad desregulada de CELF2 se ha asociado con paisajes de splicing alterados observados en modelos neuromusculares y relacionados con el cáncer, lo que impulsa estudios mecanísticos de sus dianas de ARN y sus socios reguladores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CUG-BP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CELF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CELF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CELF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CUG-BP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CELF2 para la investigación de la señalización de CUG-BP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CELF2 críticos para la función de CUG-BP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CELF2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CUG-BP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CUG-BP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CELF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CUG-BP2 (h) y el plásmido HDR CUG-BP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CELF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CELF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.