Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CtBP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-400667-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CtBP1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CtBP1 Double-Nickase-Plasmid (h) und CtBP1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CTBP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CtBP1: sc-398945
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CtBP1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400667-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CtBP1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400667-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTBP1 kodiert den transkriptionellen Korepressor CtBP1, einen konservierten Regulator, der DNA-bindende Repressoren mit chromatinmodifizierenden Komplexen verknüpft und so Genexpressionsprogramme formt. CtBP1 ist über Wechselwirkungen mit Histondeacetylasen und anderen Remodelling-Faktoren an der epigenetischen Kontrolle beteiligt und beeinflusst Prozesse wie Differenzierung, Apoptose und metabolische Anpassung. Als NAD(H)-sensitiver Koregulator integriert CtBP1 den zellulären Redoxzustand in transkriptionelle Outputs und trägt zu Signalwegen bei, darunter Wnt/β-Catenin- und TGF-β-assoziierte transkriptionelle Netzwerke. Eine veränderte CTBP1-Aktivität wurde in der Krebsbiologie und mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen mit fehlregulierter transkriptioneller Repression in Verbindung gebracht, was seine Untersuchung in genregulatorischen Schaltkreisen und krankheitsrelevanten Zellzuständen unterstützt.
CtBP1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CTBP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CTBP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CTBP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CTBP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.