CSH1 Double Nickase Plasmid (h): sc-401213-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CSH1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CSH1 Double-Nickase-Plasmid (h) und CSH1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CSH1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CSH1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CSH1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSH1 kodiert das chorionische Somatomammotropin-Hormon 1 (plazentares Laktogen), ein sezerniertes Peptidhormon, das in der menschlichen Plazenta überwiegend von Synzytiotrophoblasten produziert wird. CSH1 trägt zur mütterlich–fetalen metabolischen Anpassung bei, indem es während der Schwangerschaft über Signalwege, die mit der Prolaktin- und Wachstumshormonrezeptorfamilie zusammenhängen, die Insulinsensitivität, die Lipidmobilisierung und die Nährstoffverteilung moduliert. Seine Expression ist eng mit der Trophoblastendifferenzierung, der endokrinen Funktion der Plazenta und der Regulation fetaler Wachstumstrajektorien verknüpft. Eine dysregulierte CSH1-Expression wurde mit Phänotypen einer Plazentainsuffizienz und schwangerschaftsassoziierten Störungen in Verbindung gebracht, darunter verändertes fetales Wachstum und metabolische Komplikationen, was CSH1 für Studien zur Plazentaentwicklung und endokrinen Signalübertragung relevant macht.
CSH1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CSH1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CSH1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CSH1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CSH1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.