CRELD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407369

Descripción general

CRELD2 (rica en cisteínas con dominios tipo EGF 2) codifica una proteína residente del retículo endoplásmico que contiene enlaces disulfuro, implicada en el control de calidad de las proteínas y en la homeostasis de la vía secretora. La expresión de CRELD2 se induce con frecuencia durante el estrés del RE y se asocia con la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), donde puede influir en la proteostasis, el equilibrio redox y la secreción de proteínas cliente. A través de estos procesos, CRELD2 se ha estudiado en contextos de adaptación al estrés celular y de señalización relacionada con la inflamación, y se han descrito cambios en su expresión en múltiples escenarios relevantes para enfermedades, incluidos el cáncer y fenotipos metabólicos o fibróticos. Como modulador de vías asociadas al RE, CRELD2 constituye un nodo abordable para analizar cómo los programas secretorios sensibles al estrés moldean el estado celular y la supervivencia.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CRELD2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CRELD2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CRELD2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CRELD2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CRELD2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CRELD2 para la investigación de la señalización de CRELD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CRELD2 críticos para la función de CRELD2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CRELD2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CRELD2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CRELD2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CRELD2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CRELD2 (h) y el plásmido HDR CRELD2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CRELD2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CRELD2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.