Plásmido Doble Nickase (h2) CRABP-I: sc-405485-NIC-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h2)CRABP-I consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CRABP-I (h2) y el plásmido de doble nickasa CRABP-I (h22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CRABP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h2) CRABP-I | sc-405485-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano CRABP1 codifica la proteína citosólica de unión al ácido retinoico 1 (CRABP-I), un transportador intracelular de alta afinidad que secuestra y moviliza el ácido retinoico todo trans, modulando su disponibilidad dentro de la célula y su señalización espacio-temporal. Al regular la distribución de retinoides, CRABP-I influye en los programas de transcripción dependientes del ácido retinoico mediados por receptores nucleares (RAR/RXR) y afecta procesos como la diferenciación, la proliferación y el patrón del desarrollo. Las alteraciones en la homeostasis de los retinoides y en la expresión de CRABP1 se han asociado con una señalización desregulada en el cáncer y en otros trastornos vinculados al metabolismo de la vitamina A y a los estados de diferenciación celular. Los estudios de edición génica y perturbación de CRABP1 permiten el análisis mecanístico de las redes de señalización de retinoides, la dinámica de amortiguación del ligando y los resultados transcripcionales en modelos celulares humanos relevantes.
CRABP-I El plásmido de doble nicasa (h2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CRABP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CRABP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CRABP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CRABP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.