Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CPSF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407012
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- CPSF2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im CPSF2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CPSF2: sc-165983
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CPSF2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-407012 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
CPSF2 (Cleavage and Polyadenylation Specificity Factor, Untereinheit 2) ist ein zentraler Bestandteil der mRNA-3′-Endverarbeitungsmaschinerie in Säugetieren und trägt zur Erkennung von Polyadenylierungssignalen sowie zum Aufbau des Spaltungs- und Polyadenylierungskomplexes bei. Über seine Rolle bei der Spaltung der Prä-mRNA und der Anfügung des Poly(A)-Schwanzes beeinflusst CPSF2 die Transkript-Reifung, die mRNA-Stabilität und die Translationseffizienz und prägt damit globale Genexpressionsprogramme. Die CPSF2-abhängige 3′-Endverarbeitung steht außerdem in Wechselwirkung mit der Transkriptionsbeendigung und der alternativen Polyadenylierung – Prozesse, die das Transkriptom während Proliferation und Differenzierung umgestalten. Eine Fehlregulation der 3′-Endbildung und der Auswahl von Polyadenylierungsstellen wird häufig in krankheitsassoziierten Expressionszuständen beobachtet, wodurch CPSF2 einen nützlichen Angriffspunkt darstellt, um RNA-Prozessierungsphänotypen und deren nachgelagerte zelluläre Effekte zu untersuchen.
Das CPSF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CPSF2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CPSF2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CPSF2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CPSF2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CPSF2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CPSF2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf CPSF2-Exone abzielen, die für die CPSF2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere CPSF2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom CPSF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CPSF2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CPSF2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CPSF2 HDR-Plasmid (h) und CPSF2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CPSF2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CPSF2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.