Cox-2 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422489-LAC

Das murine Ptgs2-Gen kodiert die Cyclooxygenase-2 (Cox-2), ein induzierbares, geschwindigkeitsbestimmendes Enzym, das Arachidonsäure zu Prostaglandin H2 umsetzt und damit den Vorläuferpool für PGE2 und andere bioaktive Prostanoide bereitstellt. Die Cox-2-Expression wird durch inflammatorische Zytokine, Wachstumsfaktoren und mikrobielle Signale rasch hochreguliert – über Signalwege wie NF-κB, MAPK/ERK und AP-1 – und verknüpft so Umweltreize mit der Produktion von Lipidmediatoren. Über Prostaglandin-Signale beeinflusst Ptgs2 den Gefäßtonus, die Nozizeption, die epitheliale Homöostase sowie die Regulation angeborener und adaptiver Immunantworten. Eine fehlregulierte Cox-2-Aktivität wird umfassend in Zusammenhängen chronischer Entzündung, tumorassoziierter Mikroumgebungen und in Modellen von Gewebeschädigung untersucht, in denen prostanoidgetriebene Signalgebung Proliferation, angiogene Programme und die Rekrutierung von Immunzellen neu gestaltet.

Cox-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Ptgs2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Cox-2 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Ptgs2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Cox-2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Ptgs2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.