Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cortactin Double Nickase Plasmid (h): sc-400761-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Cortactin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Cortactin Double-Nickase-Plasmid (h) und Cortactin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CTTN abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Cortactin: sc-55579
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Cortactin Double Nickase Plasmid (h) | sc-400761-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cortactin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400761-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTTN kodiert Cortactin, ein aktinbindendes Gerüstprotein, das Arp2/3‑abhängige Aktinverzweigung koordiniert und dynamische kortikale Aktinnetzwerke stabilisiert. Indem es Filamentaufbau mit Signalmodulen verknüpft, unterstützt Cortactin die Bildung von Lamellipodien, die Endozytose und die Reifung von Invadopodien. Dabei integriert es Signale aus Src‑Familienkinasen und Rho‑GTPase‑Signalwegen, um Adhäsion und Motilität zu regulieren. Eine veränderte CTTN‑Gen-Dosierung oder ein veränderter Phosphorylierungsstatus wurde mit fehlregulierter Zytoskelett‑Remodellierung und invasiven Phänotypen in Verbindung gebracht, was CTTN für Studien zur Tumorzellmigration und metastaseassoziierter Signalübertragung relevant macht. Cortactin trägt außerdem zum Membrantransport und zum Rezeptorumsatz bei und verknüpft so Aktindynamik mit den Signaloutputs von Wachstumsfaktoren.
Cortactin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CTTN-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CTTN abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CTTN-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CTTN-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.