Contactin 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406301

Descripción general

CNTN2 codifica contactina 2 (TAG-1), una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas anclada a glicosilfosfatidilinositol (GPI), enriquecida en el sistema nervioso. La contactina 2 favorece la guía axonal, el crecimiento de neuritas y la estabilización de las interacciones neurona–glía al organizar complejos de reconocimiento en la superficie celular e influir en la remodelación del citoesqueleto durante la formación de circuitos neuronales. Contribuye al ensamblaje y mantenimiento de dominios de membrana especializados, como los segmentos iniciales del axón y los yuxtaparanodos, mediante interacciones con la matriz extracelular y socios de adhesión. La alteración de la expresión o la función de CNTN2 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que lo hace relevante para estudios de conectividad sináptica y excitabilidad neuronal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Contactin 2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CNTN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CNTN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CNTN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Contactin 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CNTN2 para la investigación de la señalización de Contactin 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CNTN2 críticos para la función de Contactin 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CNTN2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Contactin 2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Contactin 2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CNTN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Contactin 2 (h) y el plásmido HDR Contactin 2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CNTN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CNTN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.