Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Contactin 1 (h): sc-403437
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Contactin 1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Contactin 1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Contactin 1 Antibody (41): sc-136133
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Contactin 1 (h) | sc-403437 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CNTN1 code pour la contactine 1, une molécule d’adhérence cellulaire de la superfamille des immunoglobulines, ancrée à la glycosylphosphatidylinositol (GPI) et fortement exprimée dans le système nerveux. La contactine 1 participe au guidage axonal, à la croissance des neurites et à l’organisation des jonctions paranodales en coordonnant les interactions entre neurones et cellules gliales qui soutiennent la conduction saltatoire. Par son rôle dans l’adhérence cellule‑cellule et l’organisation des microdomaines membranaires, CNTN1 influence la dynamique du cytosquelette et la connectivité neuronale au cours du développement et du remodelage synaptique. Une expression ou une fonction altérée de CNTN1 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, et elle est également rapportée dans des études portant sur l’adhérence, la migration et le comportement invasif des cellules tumorales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Contactin 1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CNTN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CNTN1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CNTN1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Contactin 1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CNTN1 pour l'étude de la signalisation de Contactin 1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CNTN1 essentiels à la fonction de Contactin 1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CNTN1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Contactin 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Contactin 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CNTN1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Contactin 1 plasmide HDR (h) et le Contactin 1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CNTN1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CNTN1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.